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延長ACQUITY BEH色譜柱使用壽命的技巧

更新時間:2024-10-18      點擊次數:1184

1. 為了盡可能延長ACQUITY BEH色譜柱的使用壽命,請密切關注以下方面:

水的品質(包括水純化系統)

●溶劑品質

●流動相的制備、儲存和使用期限

●樣品、緩沖鹽和流動相的溶解性

●樣品質量及其前處理

2. 建議通過在工作流程中加入質量控制(QC)參比物質來監控系統的運行狀況。

3. 出現問題時,往往只需要糾正一個不當的操作。

4. 請務必記住:

●使用在線過濾器裝置,或者優選VanGuard保護柱。

●盡可能避免使用100%水相流動相,以阻止細菌滋生。

●每24~48小時更換一次水相流動相(如果必須使用100%水相流動相)。

●每24~48小時需將舊的100%水相流動相丟棄以阻止細菌滋生。

●每次向流動相A添加5%~10%有機溶劑,以調節梯度曲線。

●用0.2 μm濾膜過濾流動相的水相部分。

●維護水純化系統,使其保持良好的工作狀態。

●盡可能只使用超純水(18 MΩ·cm)和優質溶劑。使用HPLC級水,而不是UPLC級水。

●考慮樣品前處理(如固相萃取、過濾等)。

5. 避免事項(在可能的情況下):

100%水相流動相(如果可能)

HPLC級瓶裝水

●“添加"流動相,將“新"流動相加入到“舊"流動相中

●使用舊置的水相流動相。切記每24~48小時徹底沖洗流動相儲液瓶,并制備新鮮流動相

●磷酸鹽緩沖液與高濃度乙腈(如 > 70%)一起使用,可能會出現沉淀

6. 請勿在觀察到背壓過高或峰分裂時便認定是由于色譜柱失效所引起。請通過檢查以下問題調查色譜柱出現故障的原因:

●柱壓

●流動相是否長菌、沉淀析出和/或樣品的問題

●峰分叉

●樣品質量

●進樣溶劑的強度

7. 請牢記,通常ACQUITY色譜柱的內徑(1.02.13.0 mm)比傳統HPLC色譜柱小,因此流動相消耗會慢很多。為了降低流動相發生污染或降解的可能性,每次請僅制備分析所需

的流動相并將多余的流動相保存在冷藏環境下。

8. 流動相相關問題:

●是否在使用100%水相流動相?能否在流動相A中加入少量有機溶劑?

●是否要使用0.2 μm濾膜過濾水相流動相?

●流動相配了多久?是否需要在儲液瓶上注明制備日期?

●每24~48小時需添加流動相還是制備新鮮流動相?

●水的質量如何?水的質量最近有變化嗎?水純化系統是如何工作的?上一次維護是什么時候?

●是否在使用pH 7的磷酸鹽緩沖液(在此條件下非常容易滋生細菌)?

9. 樣品相關問題:

●如果以流動相配制的純標準品進樣,是否會出現這些問題?

●如果按照樣品前處理方法(如SPE、過濾等)用水制備標準品,是否仍會出現這些問題?

●樣品是否隨時間發生了變化?


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